实验概要
从植物中提取RBSDV病毒。
主要试剂
提取缓冲液Ⅰ（GMT）
Glycine 0.3mol/l
MgCl2 0.03mol/l
Tris-HCl 0.05mol/l (pH 7.5)
提取缓冲液Ⅱ(PB)
Na2HPO4 0.1mol/l
KH2PO4 0.1mol/l (pH 5.8)
PH较低的PB 缓冲液可以稳定完整的病毒粒子，但产量可能有一定的影响。
实验步骤
1. 取新鲜病叶100g剪成1cm碎片，加350ml提取缓冲液a，搅碎；
2. 用从重纱布过滤；
3. 加TritonX-100至3%（得到的多为较完整的病毒粒子，但产量低；若加四氯化碳至30% TritonX-100至2% 则可获得大量的亚病毒粒子），4℃搅拌1h；
4. 5,000×g离心20 min，4℃;
5. 取液相铺在1/3管体积的40%的蔗糖垫上，40,000×g 离心1.5h，4℃；
6. 用2ml缓冲液悬浮沉淀；
7. 3,500×g离心5min；
8. 上清用缓冲液稀释后40,000×g，1.5h，4℃，浓缩，悬浮后可以得到病毒的粗提物，若要获得比较纯的病毒提取物则铺在20%-50%的蔗糖密度梯度上，80,000×g离心1.5h，4℃；
9. 自上而下依次取每管2ml离心后的溶液，电镜观察，含病毒量高的管用缓冲液稀释后40,000×g，1.5h，4℃浓缩，适量缓冲液悬浮。